L’Hôpital Charles Nicolle est situé au Nord Ouest de la ville de Tunis à côté de la Médina, entre Bab Saâdoun et Bab Bnet. Son environnement immédiat est caractérisé par sa forte densité urbaine.
Il est situé à proximité du centre administratif de la Kasbah (ministères, tribunaux, municipalité de Tunis, autres sièges d’administration). Il appartient à la colline sanitaire qui regroupe en plus du Ministère de la Santé et de la Faculté de Médecine de Tunis, un ensemble des plus grands Hôpitaux et Instituts de: l’Hôpital la Rabta, l’hôpital d’enfants,l’Institut Hédi Raïes d’Ophtalmologie, l’Institut Salah Azaïez de Cancérologie, l’Institut National de Nutrition et de Technologies alimentaires, l’Institut de Neurologie, Centre de Maternité et de Néonatologie de Tunis, le Centre National de Transfusion Sanguine, le Centre National de Greffe de moelle osseuse (CNGMO), Centre National de Promotion de la Transplantation d’organes (CNPTO), l’école supérieure des sciences et techniques de la santé de Tunis (ESSTST) etc.
Son terrain est délimité et desservi comme suit :
- Au Nord : Le terrain de l’ancienne prison civile,
- A l’Est : Boulevard du 9 Avril 1938,
- Au Sud : Rue du Professeur Zouheir Essefi,
- A l’Ouest : L’ancienne Faculté de Médecine.